巴比妥毛细管电泳中缓冲液的作用电泳

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2022-11-08 07:18 标签： 毛细管电泳中缓冲液的作用

2.影响SDS电泳的关键因素有哪些

1.影响电泳迁移率的因素有哪些

2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。

分离血清蛋白电泳时应注意哪些问题

3.简述不连续PAGE的原理。

Gel Electrophoresis ：由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰胺等物质作支持体的电泳。

1.可以制成非常均匀的凝胶，带电质点在凝胶的孔中泳动。

2. 电泳操作方法简便，电泳速度快。

3. 分辨率高，重复性好，电泳图谱清晰。

4. 适用于生化，免疫等定性定量测定。

1.因不含硫酸根和羧基，几乎消除了琼脂的电渗。

2.对蛋白质吸附极微，故无拖尾现象。

3.凝胶结构均匀，孔径较大，可用来分离酶的复合物、核酸、病毒等大分子物质。

4.透明度较好，可直接或干燥成薄膜后进行染色。

5.不吸收紫外光，可直接利用紫外光吸收法作定量测定。

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对流免疫电泳使用的缓冲液为A、碳酸盐缓冲液B、碳酸氢盐缓冲液C、醋酸盐缓冲液D、磷酸盐缓冲液E、巴比

对流免疫电泳使用的缓冲液为

滴眼剂中常用的缓冲溶液有

滴眼剂中常用的缓冲溶液有

滴眼剂中常用的缓冲溶液有

包被过程中最常用的缓冲液为A.pH96的磷酸盐缓冲液B.pH96的碳酸盐缓冲液C.pH96的醋酸盐缓冲液D.pH

包被过程中最常用的缓冲液为

A.pH96的磷酸盐缓冲液

B.pH96的碳酸盐缓冲液

C.pH96的醋酸盐缓冲液

D.pH76的磷酸盐缓冲液

E.pH76的碳酸盐缓冲液

2018-34,滴眼剂常用的缓冲溶液是（）

在进行对流免疫电泳时，使用的缓冲液为A、Tris-硼酸缓冲液B、甘氨酸缓冲液C、醋酸盐缓冲液D、磷酸盐缓

在进行对流免疫电泳时，使用的缓冲液为

在进行对流免疫电泳时，常使用的缓冲液为A、Tris-硼酸缓冲液B、甘氨酸缓冲液C、醋酸盐缓冲液D、磷酸盐

在进行对流免疫电泳时，常使用的缓冲液为

下列何种缓冲液对ALP具有激活作用（）。A、甘氨酸缓冲液B、磷酸盐缓冲液C、碳酸盐缓冲液D、巴比妥缓冲

下列何种缓冲液对ALP具有激活作用（）。

E、2－氨基－2－甲基－1－丙醇缓冲液

1、琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 Agarose Gel Electrophoresis概概 述述 凝胶电泳：由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰凝胶电泳：由琼脂、琼脂糖、淀粉胶及聚丙烯酰 胺等物质作支持体的电泳。胺等物质作支持体的电泳。 特点：特点： 1.1.可以制成非常均匀的凝胶，带电质点在凝胶的孔可以制成非常均匀的凝胶，带电质点在凝胶的孔 中泳动。中泳动。 2. 2. 电泳操作方法简便，电泳速度快电泳操作方法简便，电泳速度快 3. 3. 分辨率高，重复性好，电泳图谱清晰。分辨率高，重复性好，电泳图谱清晰。 4. 4. 适用于生化，免疫等定性定量测定适用于生化，免疫等定性定量测定琼脂糖凝胶琼脂糖凝胶天然琼脂（agar）:又名琼胶、菜燕、冻粉 从石花菜及其它红藻类植物提取出来的一种线状 高聚物。 琼脂糖（agarose）琼脂胶（agaropectin） Acid sulfateCarboxylic acid groups在电场作用下能产生较强的电渗现象琼脂糖半乳糖及其衍生物构成的中性物质，不 带电荷琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作琼脂糖链依分子内和分子间氢键及其它力的作 用使其互相盘绕

2、形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型用使其互相盘绕形成绳状琼脂糖束，构成大网孔型 凝胶。凝胶。 D-D-半乳糖半乳糖3 3，6-6-脱水脱水- -L-L-半乳糖半乳糖琼脂糖凝胶的特点琼脂糖凝胶的特点（一）优点（一）优点 1.1.因不含硫酸根和羧基，几乎消除了琼脂的电渗因不含硫酸根和羧基，几乎消除了琼脂的电渗 2.2.对蛋白质吸附极微，故无拖尾现象对蛋白质吸附极微，故无拖尾现象。 3.3.凝胶结构均匀，孔径较大，可用来分离酶的复合凝胶结构均匀，孔径较大，可用来分离酶的复合 物、核酸、病毒物、核酸、病毒 等大分子物质等大分子物质。 4.4.透明度较好透明度较好，可直接或干燥成薄膜后进行染色。，可直接或干燥成薄膜后进行染色。 5.5.不吸收紫外光不吸收紫外光，可直接利用紫外光吸收法作定量，可直接利用紫外光吸收法作定量 测定测定 6.6.有热可逆性有热可逆性（二）缺点（二）缺点 1.1.机械强度差机械强度差，易破碎，浓度不能太低。，易破碎，浓度不能太低。 2.2.易被细菌污染易被细菌污染，不易保存，临用前配制。，不易保存，临用前配制。 3.3.琼脂糖支持层上的琼脂糖支持层上的区带易于扩散区带易于扩散

3、，电泳后，电泳后 必须立即固定染色。必须立即固定染色。 4.4.与与PAGEPAGE相比，相比，分子筛作用小分子筛作用小，区带少。，区带少。 应应 用用1. 1. 适用于大分子的核酸、核蛋白等的分离、适用于大分子的核酸、核蛋白等的分离、 鉴定及纯化鉴定及纯化 2. 2. 临床生化检验中常用于临床生化检验中常用于LDHLDH、CKCK等同工酶等同工酶 的分离与检测的分离与检测 3. 3. 为不同类型的高脂蛋白血症、冠心病等提为不同类型的高脂蛋白血症、冠心病等提 供生化指标供生化指标琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳分离血浆脂蛋白原理血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后， 以琼脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6巴比 妥缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成 、大小、形状分离成不同区带。 ( (一一) )血清脂蛋白血清脂蛋白(

4、胆固醇 （FCFC）胆固醇酯胆固醇酯 （CECE） 少量糖少量糖（二）分类（二）分类 1. 1. 按电泳法分按电泳法分乳糜微粒（乳糜微粒（chylomicronchylomicron,CM,CM） - -脂蛋白脂蛋白 （ - -位）位）前前 - -脂蛋白（脂蛋白（ 2 2- -位）位） - -脂蛋白脂蛋白 （ 1 1- -位）位） 2. 2. 按超速离心法分按超速离心法分乳糜微粒乳糜微粒( (chylomicronchylomicron, ,CM)CM) ( pIpI ，各种脂蛋白均带负电，电各种脂蛋白均带负电，电 泳时由负极到正极；泳时由负极到正极；VLDLVLDL为圆形，受阻力为圆形，受阻力 小，小，LDLLDL形态不规则，受阻力大，所以形态不规则，受阻力大，所以VLDLVLDL 跑在前。跑在前。加样槽加样槽 前前 CM LDL VLDL HDLCM LDL VLDL HDL+ +临床应用：高脂蛋白血症的分型CM 前 正常 型 a型 b型 型 型 型操作玻璃片预染色的标本预染色的标本正常参考值（百分比） -脂蛋白 30-40% 前-脂蛋白 15% -脂蛋白 55%l l注意事项：注意事项：血清样品要新鲜；血清样品要新鲜；为了免去离心步骤，吸取预染血清时，应为了免去离心步骤，吸取预染血清时，应 吸取上层，下层或管底可能有染料颗粒沉渣吸取上层，下层或管底可能有染料颗粒沉渣 ，否则应再离心后吸预染血清，否则应再离心后吸预染血清。 名词解释名词解释 1.1.迁移率迁移率 2.2.电渗电渗 3.3.电泳电泳 问答题问答题 1.1.影响电泳迁移率的因素有哪些？影响电泳迁移率的因素有哪些？ 2.2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。复习思考题复习思考题参参 考考 书书 目目临床生物化学及生物化学检验临床生物化学及生物化学检验 第三版第三版人民卫生出版社人民卫生出版社 周新周新 主编主编电泳科学出版社电泳科学出版社 何忠效何忠效 张树政张树政 主编主编蛋白质电泳实验技术蛋白质电泳实验技术 科学出版社科学出版社 郭尧君郭尧君蛋白质技术手册蛋白质技术手册 科学出版社科学出版社 汪家政汪家政 范敏范敏 主编主编

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