测定细菌数量的方法
1、计数器测定法：
即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的细菌数，可计算样品中的含菌数。本法简便易行，可立即得出结果。
本法不仅适于细菌计数，也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。
2、电子计数器计数法:
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化，小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时，电阻明显增加，形成一个脉冲，自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确，但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌。因此，要求菌悬液中不含任何碎片。
3、活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释，然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数，可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高，是一种检测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或过少均不准确；②为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法。
4、比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比，与光密度成正比，所以，可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液，得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品，不能用此法测定。
5、测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，以清水洗净放人干燥器加热烘干，使之失去水分然后称重。
此法适于菌体浓度较高的样品，是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
6、测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分，含量较稳定，测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。
7、颜色改变单位法（colour change unit,简称CCU）
这种方法通常用于很小，用一般的比浊法无法计数的微生物，比如支原体等，因为支原体的液体培养物是完全透明的，呈现为清亮透明红色，因此无法用比浊法来计数，由于支原体固体培养很困难，用cfu法也不容易计数，因此需要用特殊的计数方法，即CCU法。它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标，来计数微生物的相对含量的，下面以解脲脲原体为例，简单介绍其操作：
（1）.取12只无菌试管，每一管装1.8ml解脲脲原体培养基。
（2）.在第一管加入0.2ml待测解脲脲原体菌液，充分混匀，从中吸取0.2ml加入第二管，依次类推，10倍梯度稀释，一直到最末一管
（3）.于37度培养，以培养基颜色改变的最末一管作为待测菌液的CCU，也就是支原体的最大代谢活力，比如第六管出现颜色改变，他的相对浓度就是10的6次方CCU/ml.
一般来说，比浊法和菌落计数法就可以满足绝大多数细菌的计数，但是对支原体这样比较特
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2022年高一生物知识点 第1篇
基因和染色体的关系
一、基本概念：
染色体
(1)同源染色体：是在二倍体生物细胞中，形态、结构基本相同的染色体，并在减数第一次分裂(参考减数分裂)的四分体时期中彼此联会(若是三倍体及其他奇数倍体生物细胞，联会时会发生紊乱)，最后分开到不同的生殖细胞(即精子、卵细胞)的一对染色体，在这一对染色体中一个来自母方，另一个来自父方。
(2)非同源染色体：指大小,形态不同，且在减数分裂过程中不配对的染色体。
联会和四分,
(1)联会：是指减数第一次分裂过程中(前期)同源染色体两两配对的现象。
(2)交叉互换：指四分体时期，非姐妹染色单体发生缠绕，并交换部分片段的现象。
(3)四分体：是在动物细胞减数第一次分裂(减I)的前期，两条已经自我复制的同源染色体联会形成的四条染色单体的结合体。
染色单体
(1)染色体：生物体中的大多数细胞处于染色体状态，因为一般认为染色体只存在于有丝分裂的间期，而大多数细胞处于间期状态，而只有极少数的细胞处于分裂期，拥有染色单体。
(2)染色单体：在分裂间期染色体只有一个DNA分子，即2条脱氧核苷酸链;而在分裂期的染色体有两个DNA分子，也就是两条染色单体，4条脱氧核苷酸链。
(3)非姐妹染色单体：不同着丝点相连的染色单体
(4)一对同源染色体= 一个四分体=2条染色体=4条染色单体=4个DNA分子。
二、减数分裂：
定义：减数分裂是进行有性生殖的生物在产生成熟生殖细胞时，进行的染色体数目减半的细胞分裂。在减数分裂过程中，染色体只复制一次，而细胞分裂两次。减数分裂的结果是，成熟生殖细胞中的染色体数目比原始生殖细胞的减少一半。减半发生在减数第一次分裂。
范围：进行有性生殖的生物
时期：产生成熟的生殖细胞时
场所：生殖器官内(动物的精巢、卵巢;植物的花药、胚珠;精巢、卵巢内既有有丝分裂，又有减数分裂)
特点：染色体只复制一次，而细胞分裂两次
结果：成熟生殖细胞中染色体数目比原始生殖细胞的数目减半
实质：一种特殊的有丝分裂
精子的形成过程
1个精原细胞(2n)
↓间期：染色体复制
1个初级精母细胞(2n)
↓前期：联会、四分体、交叉互换(2n)
中期：同源染色体排列在赤道板上(2n)
后期：配对的同源染色体分离(2n)
末期：细胞质均等分裂
2个次级精母细胞(n)
↓前期：(n)
中期：(n)
后期：染色单体分开成为两组染色体(2n)
末期：细胞质均等分离(n)
4个精细胞：(n)
↓变形
4个精子(n)
卵细胞的形成过程
1个卵原细胞(2n)
↓间期：染色体复制
1个初级卵母细胞(2n)
↓前期：联会、四分体…(2n)
中期：(2n)
后期：(2n)
末期：细胞质不均等分裂(2n)
1个次级卵母细胞+1个极体(n)
↓前期：(n)
中期：(n)
后期：(2n)
末期：(n)
2022年高一生物知识点 第2篇
一、光合作用的原理
1、光合作用的探究历程：(略)
2、光合作用的过程：(熟练掌握课本P103下方的图)
总反应式：CO2+H2O、(CH2O)+O2，其中(CH2O)表示糖类。
根据是否需要光能，可将其分为光反应和暗反应两个阶段。
光反应阶段：必须有光才能进行
场所：类囊体薄膜上
水的光解：H2O、1/2O2+2[H]
ATP形成：ADP+Pi+光能、ATP
光反应中，光能转化为ATP中活跃的'化学能
暗反应阶段：有光无光都能进行
场所：叶绿体基质
CO2的固定：CO2+C5、2C3
C3的还原：2C3+[H]+ATP、(CH2O)+C5+ADP+Pi
暗反应中，ATP中活跃的化学能转化为(CH2O)中稳定的化学能
联系：
光反应为暗反应提供ATP和[H]，暗反应为光反应提供合成ATP的原料ADP和Pi
二、影响光合作用的因素及在生产实践中的应用
(1)光对光合作用的影响
①光的波长
叶绿体中色素的吸收光波主要在红光和蓝紫光。
②光照强度
植物的光合作用强度在一定范围内随着光照强度的增加而增加，但光照强度达到一定时，光合作用的强度不再随着光照强度的增加而增加
③光照时间
光照时间长，光合作用时间长，有利于植物的生长发育。
(2)温度
温度低，光和速率低。随着温度升高，光合速率加快，温度过高时会影响酶的活性，光和速率降低。
生产上白天升温，增强光合作用，晚上降低室温，抑制呼吸作用，以积累有机物。
(3)CO2浓度
在一定范围内，植物光合作用强度随着CO2浓度的增加而增加，但达到一定浓度后，光合作用强度不再增加。
生产上使田间通风良好，供应充足的CO2
(4)水分的供应当植物叶片缺水时，气孔会关闭，减少水分的散失，同时影响CO2进入叶内，暗反应受阻，光合作用下降。
2022年高一生物知识点 第3篇
从生物圈到细胞
一、相关概念
细胞：是生物体结构和功能的基本单位。除了病毒以外，所有生物都是由细胞构成的。细胞是地球上最基本的生命系统
生命系统的结构层次：细胞→组织→器官→系统(植物没有系统)→个体→种群
→群落→生态系统→生物圈
二、病毒的相关知识：
1、病毒(Virus)是一类没有细胞结构的生物体。主要特征：
①、个体微小，一般在10~30nm之间，大多数必须用电子显微镜才能看见;
②、仅具有一种类型的核酸，DNA或RNA，没有含两种核酸的病毒;
③、专营细胞内寄生生活;
④、结构简单，一般由核酸(DNA或RNA)和蛋白质外壳所构成。
2、根据寄生的宿主不同，病毒可分为动物病毒、植物病毒和细菌病毒(即噬菌体)三大类。根据病毒所含核酸种类的不同分为DNA病毒和RNA病毒。
3、常见的病毒有：人类流感病毒(引起流行性感冒)、SARS病毒、人类免疫缺陷病毒(HIV)[引起艾滋病(AIDS)]、禽流感病毒、乙肝病毒、人类天花病毒、狂犬病毒、烟草花叶病毒等。
细胞的多样性和统一性
一、细胞种类：
根据细胞内有无以核膜为界限的细胞核，把细胞分为原核细胞和真核细胞
二、原核细胞和真核细胞的比较：
1、原核细胞：细胞较小，无核膜、无核仁，没有成形的细胞核;遗传物质(一个环状DNA分子)集中的区域称为拟核;没有染色体，DNA不与蛋白质结合，;细胞器只有核糖体;有细胞壁，成分与真核细胞不同。
2、真核细胞：细胞较大，有核膜、有核仁、有真正的细胞核;有一定数目的染色体(DNA与蛋白质结合而成);一般有多种细胞器。
3、原核生物：由原核细胞构成的生物。如：蓝藻、细菌(如硝化细菌、乳酸菌、大肠杆菌、肺炎双球菌)、放线菌、支原体等都属于原核生物。
4、真核生物：由真核细胞构成的生物。如动物(草履虫、变形虫)、植物、真菌(酵母菌、霉菌、粘菌)等。
三、细胞学说的建立：
1、1665英国人虎克(RobertHooke)用自己设计与制造的显微镜(放大倍数为40-140倍)观察了软木的薄片，第一次描述了植物细胞的构造，并首次用拉丁文cella(小室)这个词来对细胞命名。
2、1680荷兰人列文虎克()，首次观察到活细胞，观察过原生动物、人类精子、鲑鱼的红细胞、牙垢中的细菌等。
3、19世纪30年代德国人施莱登(MatthiasJacobSchleiden)、施旺(TheodarSchwann)提出：一切植物、动物都是由细胞组成的.，细胞是一切动植物的基本单位。这一学说即"细胞学说(CellTheory)"，它揭示了生物体结构的统一
2022年高一生物知识点 第4篇
1、糖类：
①单糖：葡萄糖、果糖、核糖、脱氧核糖
②二糖：麦芽糖、蔗糖、乳糖
③多糖：淀粉和纤维素(植物细胞)、糖原(动物细胞)
2、脂质：
脂肪：储能;保温;缓冲;减压
磷脂：生物膜重要成分
固醇：包括胆固醇、性激素(促进人和动物生殖器官的发育及生殖细胞形成)、维生素D(促进人和动物肠道对Ca和P的吸收)
3、多糖，蛋白质，核酸等都是生物大分子，组成单位依次为：单糖、氨基酸、核苷酸。
生物大分子以碳链为基本骨架，所以碳是生命的核心元素。
4、细胞内水的存在形式为结合水和自由水
自由水(%)：良好溶剂;参与生物化学反应;提供液体环境;运送营养物质及代谢废物;绿色植物进行光合作用的原料
结合水(%)：组成细胞的成分之一
5、无机盐绝大多数以离子形式存在。哺乳动物血液中Ca2+过低，会出现抽搐症状;患急性肠炎的病人脱水时要补充输入葡萄糖盐水;高温作业大量出汗的工人要多喝淡盐水。
6、细胞膜主要由脂质和蛋白质，和少量糖类组成，脂质中磷脂最丰富，功能越复杂的细胞膜，蛋白质种类和数量越多;细胞膜基本支架是磷脂双分子层;细胞膜具有一定的流动性和选择透过性。将细胞与外界环境分隔开
7、细胞膜的功能控制物质进出细胞进行细胞间信息交流
8、植物细胞的细胞壁成分为纤维素和果胶，具有支持和保护作用
9、制取细胞膜利用哺乳动物成熟红细胞，因为无核膜和细胞器膜
10、(1)还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)可与斐林试剂反应生成砖红色沉淀;脂肪可苏丹III染成橘黄色(或被苏丹IV染成红色);淀粉(多糖)遇碘变蓝色;蛋白质与双缩脲试剂产生紫色反应
(2)还原糖鉴定材料不能选用甘蔗
(3)斐林试剂必须现配现用(与双缩脲试剂不同，双缩脲试剂先加A液，再加B液)
11、蛋白质的基本组成单位是氨基酸，氨基酸结构通式为NH2—C—COOH，各种氨基酸的区别在于R基的不同
12、两个氨基酸脱水缩合形成二肽，连接两个氨基酸分子的化学键(—NH—CO—)叫肽键
13、脱水缩合中，脱去水分子数=形成的肽键数=氨基酸数—肽链条数
14、蛋白质多样性原因：
(1)组成蛋白质的氨基酸种类不同
(2)组成蛋白质数目不相同
(3)组成蛋白质的氨基酸排列顺序不同
(4)每种蛋白质分子的空间结构不相同
2022年高一生物知识点 第5篇
从生物圈到细胞
1、病毒没有细胞结构，但必须依赖(活细胞)才能生存，寄生在活细胞中，利用细胞里的物质结构基础生活，繁殖。
2、生命活动离不开细胞，细胞是生物体结构和功能的(基本单位)。
3、生命系统的结构层次：(细胞)、(组织)、(器官)、(系统)、(个体)、(种群)(群落)、(生态系统)、(生物圈)。
4、血液属于(组织)层次，皮肤属于(器官)层次。
5、植物没有(系统)层次，单细胞生物既可化做(个体)层次，又可化做(细胞)层次。
6、地球上最基本的生命系统是(细胞)。生物圈是最大的生态系统。
7、种群：在一定的区域内同种生物个体的总和。例：一个池塘中所有的鲤鱼。
8、群落：在一定的区域内所有生物的总和。例：一个池塘中所有的生物。(不是所有的鱼)
9、生态系统：生物群落和它生存的无机环境相互作用而形成的统一整体。
10、生物圈中存在着众多的单细胞生物，单个细胞就能完成各种生命活动。许多植物和动物是多细胞生物，他们依赖各种分化的细胞密切合作，共同完成一系列复杂的生命活动。以细胞代谢为基础的生物与环境之间的物质和能量的交换;以细胞增殖、分化为基础的生长与发育;以细胞内基因的传递和变化为基础的遗传与变异。
细胞的多样性和统一性
知识梳理：
细胞的统一性：动植物细胞基本相似结构，都具有细胞膜、细胞质、细胞核(哺乳动物、成熟的红细胞没有细胞核)。
一、高倍镜的使用步骤：“一移二转三调”
1、在低倍镜下找到物象，将物象移至(视野中央)，
2、转动(转换器)，换上高倍镜。
3、调节(光圈)和(反光镜)，使视野亮度适宜。
4、调节(细准焦螺旋)，使物象清晰。
二、显微镜使用常识
1、调亮视野的两种方法(放大光圈)、(使用凹面镜)。
2、高倍镜：物象(大)，视野(暗)，看到细胞数目(少)。
低倍镜：物象(小)，视野(亮)，看到的细胞数目(多)。
3、物镜：(有)螺纹，镜筒越(长)，放大倍数越大。
目镜：(无)螺纹，镜筒越(短)，放大倍数越大。
放大倍数越大 视野范围越小 视野越暗 视野中细胞数目越少 每个细胞越大
放大倍数越小 视野范围越大 视野越亮 视野中细胞数目越多 每个细胞越小
4、放大倍数=物镜的放大倍数х目镜的放大倍数
5、一行细胞的数目变化可根据视野范围与放大倍数成反比
计算方法：个数×放大倍数的比例倒数=最后看到的细胞数
如:在目镜10×物镜10×的视野中有一行细胞,数目是20个,在目镜不换物镜换成40×,那么在视野中能看见多少个细胞? 20×1/4=5
6、圆行视野范围细胞的数量的变化可根据视野范围与放大倍数的平方成反比计算
如:在目镜为10×物镜为10×的视野中看见布满的细胞数为20个,在目镜不换物镜换成20×,那么在视野中我们还能看见多少个细胞? 20×(1/2)2=5
三、原核生物与真核生物：
科学家根据细胞内有无核膜为界限的细胞核，把细胞分为真核细胞和原核细胞两大类。
原核生物：细菌(球、杆、螺旋、弧菌、乳酸菌)、衣原体、蓝藻、支原体(没有细胞壁，最小的细胞生物)、放线菌、立克次氏体
真核生物：植物、动物、真菌(蘑菇、酵母菌、霉菌、大型真菌)
病毒非真非原。
蓝藻：发菜、颤藻、念珠藻、蓝球藻。蓝藻没有成型的细胞核，有拟核——环状DNA分子。
蓝藻细胞质：含蓝藻素和叶绿素(物质基础)，能进行光合作用(自养生物);核糖体。
细菌中的绝大多数种类是营腐生或寄生生活的异氧生物。
原核细胞具有与真核细胞相似的细胞膜和细胞质，没有有核膜包被的细胞核，也没有染色体，但有一个环状的DNA分子，位于细胞内特定的区域，这个区域叫拟核。
四、细胞学说
1、创立者：(施莱登，施旺)对动植物细胞的研究而揭示细胞的统一性和生物体结构统一性。
2、细胞的发现者及命名者：英国科学家 罗伯特.虎克
3、内容要点：共三点。其中新细胞可以从老细胞中产生应改为细胞通过分裂产生新细胞。
4、揭示问题：揭示了(细胞统一性，和生物体结构的统一性)。
2022年高一生物知识点 第6篇
生物的变异
(1 )基因突变
①基因突变的概念：由于DNA分子中发生碱基对的增添、缺失或改变，而引起的基因结构的改变。
②基因突变的特点： 基因突变在生物界中普遍存在 基因突变是随机发生的 基因突变的频率是很低的 大多数基因突变对生物体是有害的 基因突变是不定向的
③基因突变的意义：生物变异的根本来源，为生物进化提供了最初的原材料。
④基因突变的类型：自然突变、诱发突变
⑤人工诱变在育种中的应用：通过人工诱变可以提高变异的频率，可以大幅度地改良生物的性状。
(2) 染色体变异
①染色体结构的变异：缺失、增添、倒位、易位。如：猫叫综合征。
②染色体数目的变异：包括细胞内的个别染色体增加或减少和以染色体组的形式成倍地增加减少。
③染色体组特点：a、一个染色体组中不含同源染色体 b、一个染色体组中所含的染色体形态、大小和功能各不相同 c、一个染色体组中含有控制生物性状的一整套基因
④二倍体或多倍体：由受精卵发育成的个体，体细胞中含几个染色体组就是几倍体;由未受精的生殖细胞(精子或卵细胞)发育成的个体均为单倍体(可能有1个或多个染色体组)。
⑤人工诱导多倍体的方法：用秋水仙素处理萌发的种子和幼苗。原理：当秋水仙素作用于正在分裂的细胞时，能够抑制细胞分裂前期纺锤体形成，导致染色体不分离，从而引起细胞内染色体数目加倍。
2022年高一生物知识点 第7篇
低温诱导染色体加倍
一、实验原理与步骤：
原理：用低温处理植物分生组织细胞，能抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞的染色体数发生变化。
步骤：⑴低温诱导。⑵卡诺氏液中浸泡以固定细胞的形态，再用95%的'酒精冲洗2次。⑶制作装片(解离、漂洗、染色、制片)。⑷显微镜观察。
二、课后讨论题答案：
低温诱导和秋水仙素处理都是通过抑制分裂细胞内纺锤体的形成，使染色体不能移向细胞两极，而引起细胞内染色体数目加倍。卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid)
适用于一般植物组织和细胞的固定,常用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入70%酒精中保存.固定液的重要特性是能迅速穿透细胞，将其固定并维持染色体结构的完整性，还要能够增强染色体的嗜碱性，达到优良染色效果。
配方：无水酒精3份、冰醋酸1份、或无水乙醇6份，氯仿3份，冰醋酸1份。
调查常见的人类遗传病
一、实验原理与步骤：
原理：显性遗传病具有世代相传的特点，隐性遗传病隔代出现。伴X染色体隐性遗传病的遗传特点是交叉遗传，隔代出现，患者男性多于女性。伴X染色体显性遗传病的遗传特点是世代相传，患者女性多于男性。
步骤：①确定要调查的遗传病，掌握其症状及表现 ②设计记录表格及调查要点③分多个小组调查，获得足够大的群体调查数据④汇总结果，统计分析
二、注意事项：
1、调查时，最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病，如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等
2、为保证调查的群体足够大，小组调查的数据，应在班级和年级中进行汇总
某遗传病的发病率=某种遗传病的患病人数/某种遗传病的被调查人数
探究生长素类似物促进插条生根的最适浓度
一、实验原理：
植物插条经生长素类似物处理后，对植物插条的生根情况有很大的影响，而且用不同浓度、不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度，在此浓度下植物插条的生根数量最多，生长最快。
二、实验注意事项
选择插条：以1年生苗木为最好(1年或2年生枝条形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活)
处理插条：枝条的形态学上端为平面，下端要削成斜面，这样在扦插后可增加吸收水分的面积，促进成活。
处理方法：
1)浸泡法：把插条的基部浸泡在配制好的溶液中，深约3cm，处理几小时至一天。(要求的溶液浓度较低，并且最好是在遮阴和空气湿度较高的地方进行处理)
2022年高一生物知识点 第8篇
微生物的培养与应用
1、培养基的种类：按物理性质分为固体培养基和液体培养基，按化学成分分为合成培养基和天然培养基，按用途分为选择培养基和鉴别培养基。
2、培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源、无机盐P14
3、微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。
4、培养基还需满足微生物对PH、特殊营养物质以及O2的要求。
5、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。
6、常用灭菌方法有：灼烧灭菌，将接种工具如接种环、接种针灭菌;干热灭菌：如玻璃器皿、金属用具等需保持干燥的物品。高压蒸汽灭菌：如培养基的灭菌。
7、用固体培养基对大肠杆菌纯化培养，可分为两步：制备培养基和纯化大肠杆菌。
8、固体培养基的制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
9、微生物常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。
10、平板划线法是通过连续划线，将菌种逐步稀释分散到培养基表面，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，分别涂布到培养基表面。当它们稀释到一定程度后，微生物将分散成单个细胞，从而在培养基上形成单个菌落。
11、微生物的计数方法：活菌计数法、显微镜直接计数法、滤膜法。
12、活菌计数法就是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少个活菌。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的只是一个菌落。
13、显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，但它包括了死亡的微生物。
14、设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响。提高实验结果的可信度。①如何证明培养基是否受到污染：实验组的培养基中接种要培养的微生物，对照组中的培养基接种等量的蒸馏水(设置空白对照)。②如何证明某选择培养基是否有选择功能：实验组中的培养基用该选择培养基，对照组中培养基用普通培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)。如果普通培养基的菌落数明显大于选择培养基中的数目，则说明该选择培养基有选择功能。
15、如何分离分解尿素的细菌?培养基中以尿素为唯一氮源，加入酚红指示剂，如果PH升高，指示剂变红，可初步鉴定该菌能分解尿素。
16、如何分离分解纤维素的微生物?以纤维素为唯一碳源的培养基。
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1、、微生物纯培养技术、微生物纯培养技术纯培养基本步骤：纯培养基本步骤：稀释平皿法稀释平皿法划线法划线法单细胞挑取法单细胞挑取法纯培养方法纯培养方法 (2) 培养培养(1) 分离分离自生固氮菌的分离纯化细菌的分离纯化一、目的要求：1、学习微生物纯系分离、培养方法。2、掌握划线分离纯化微生物的方法。二、基本原理：
为了生产和科学研究的需要，往往需要从自然界混杂的微生物群中分离单一的菌种，这种获得单一菌株纯培养的方法称为微生物的分离。第一节第一节 微生物纯培养微生物纯培养二、微生物纯培养技术二、微生物纯培养技术1、稀释平板分离法、稀释平板分离法：倾注平板法和涂布平板法。：倾注平板法和涂布平板法。 基本
2、过程：（基本过程：（1）梯度稀释过程；（）梯度稀释过程；（2）分离培养过程）分离培养过程涂布涂布倾注倾注梯梯 度度 稀稀 释释 过过
程程10-110-210-310-410-510-6固体培养基分离纯培养、稀释倒平板法：稀释不同稀释液少许与50oc左右的琼脂培养基混合倾入平皿。2、涂布平板法：稀释倾入平皿不同稀释液少许涂布在琼脂培养基。3、平板划线分离法：少许待分离物平板划线（连续划线和分区划线）。4、稀释摇管法：待分离物用培养基稀释摇匀在琼脂表面封石蜡。液体培养基分离纯培养同一稀释度做多个平行管，95%表现为不生长
。二、微生物纯培养技术二、微生物纯培养技术4) 操作要点：操作要点： 无菌
3、操作无菌操作稀释平板分离法使用过程中的几个问题稀释平板分离法使用过程中的几个问题1) 梯度稀释度的确定：梯度稀释度的确定： 需分离微生物在样品中的数量需分离微生物在样品中的数量2) 选择菌落接种的依据：选择菌落接种的依据： a、菌落特征；、菌落特征； b、菌体的特征、菌体的特征3) 微生物纯培养的标准：微生物纯培养的标准：
菌落特征一致性菌落特征一致性固体培养基分离纯培养菌落:单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。菌苔：当固体培养基表面众多菌落连成一片时。平板（培养平板）：它是指熔化的固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛
4、有固体培养基的平皿。3、平皿划线法、平皿划线法 用接种环沾少许待分离的材料，在培养基表面进行多次平行划线，使微用接种环沾少许待分离的材料，在培养基表面进行多次平行划线，使微生物细胞分开生长以获得微生物纯培养的过程。生物细胞分开生长以获得微生物纯培养的过程。2、单细胞挑取法：、单细胞挑取法：
从待分离材料中挑取从待分离材料中挑取一个细胞来培养，从而获一个细胞来培养，从而获得纯培养的过程。得纯培养的过程。单细胞（单孢子）分离在显微镜下用毛细管或显微针、钩、环等挑取单细胞（单孢子）培养。选择培养分离1、利用选择培养基进行直接分离。2、富集培养（多次培养后再分离）二元培养物：培养物中含 有二种微生物。
5、寄生物如病毒 ，原生动物如纤毛虫。
为了获得某种微生物的纯培养，可采用下列两种方法：一种是提供有利于该微生物生长繁殖的最适培养基及培养条件。如要从土壤中分离自生固氮菌，则其培养基中是不能含有n源，这种培养基就比较适于能利用空气中n2的微生物。另一种方法是在培养基中加入某种化学物质，以抑制人们所不需要的微生物的生长繁殖。分离土壤中真菌，往往在分离真菌的马丁培养基中加入适当的孟加拉红，链霉素和金霉素等化学药品，目的在于抑制细菌生长，这样更有利于获得其纯培养。
tupian 土壤中微生物数量众多，在肥沃土壤中固氮菌数量也很多，自然界中多数氮素养料是由微生物固氮的结果，固氮菌一般可分为自生固氮菌和共生
6、固氮菌两类。 要分离自生固氮菌，常用阿斯毕无氮培养基这种选择培养基，控制其适宜环境条件，使它在培养基上大量繁殖，然后通过稀释法和划线分离纯化法，使它在培养基上形成单菌落，如分离所得不纯，需要进一步纯化，直到得到纯种.三、材料与仪器1、培养基：阿斯毕无氮培养基。2、菜园土。3、灭菌培养皿、镊子、剪刀、接种针、酒精灯等四、方法与步骤 （一）富集培养：
:(上次已做实验) 1、加入1ml土壤菌悬液于灭菌平板 2 、加入已灭菌后冷却至50oc左右的阿斯毕培养基，混匀。 3、正面放置培养箱中培养，28oc培养34天后，在土粒周围有混浊半透明的胶状菌落出现，有的在后期会产生褐色的色素。（二）划线分离纯化
7、1、用已溶化至50oc阿斯毕培养基倒入平板。 2、用接种环挑取上述菌落少许，在冷凝平板上进行划线分离，而后置28oc培养4天。 划线方法如图：1234（三）纯化、镜检，得到纯种培养 1、平板上出现单菌落，按无菌操作移入阿斯毕培养基斜面试管中，28oc培养4天。
2、镜检：将斜面菌株进行涂片、染色、镜检。如是粗短杆状或球状的单一形态的菌体细胞较大，常呈单个或“8”字排列，在细胞表面有较厚的荚膜者，即为自生固氮菌。如有杂菌，需要进一步划线纯化。 3、将得到纯化菌株，移接到另一阿斯毕培养基斜面管，28oc培养34天，即获得纯培养菌，可冷冻保存，备用。五、注意事项： （1）在微生物分离、纯化每一操作环节，要严格按照无菌操作进行。
（2）平板划线时，划线部位不可重叠。 （3）划线时，每次都要将接种环上多余菌体烧掉。 （4）培养皿