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载体和菌株清单-2012载体,菌株,载体菌株,载体和菌株,模式菌株,菌株的活化,hfr菌株,埃博拉菌株
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载体和菌株清单-2012
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3秒自动关闭窗口常见克隆载体pACYC184-上海北诺生物科技有限公司
上海北诺生物科技有限公司
免疫学,细胞学,分子生物学,微生物学,即用型试剂,常规生化试剂一站式供应平台,生命科学领域优质产品和服务供应商
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常见克隆载体pACYC184
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上海北诺生物科技有限公司
【简单介绍】
可提供近万种质粒载体、菌株、基因和细胞株,并可提供实验技术外包服务,如基因克隆、质粒构建、蛋白原核、真核表达及纯，pQE 载体，原核表达载体，克隆载体 ，毕赤酵母表达载体，毕赤酵母宿主菌，酿酒酵母表达载体 ，酿酒酵母宿主菌，真菌表达载体，真核哺乳动物荧光载体，真核哺乳动物载体，植物表达载体，大肠杆菌宿主菌，枯草宿主菌pET载体常见克隆载体pACYC184
【详细说明】
&更多详情咨询&&& , 021-&下面所有质粒和菌株，均为本公司实验室亲自验证过，可以提供技术支持，载体来源于promega,addgene,clontech,novagen,invitrogen可提供质粒图谱，可提供近万种质粒载体、菌株、基因和细胞株,并可提供实验技术外包服务,如基因克隆、质粒构建、蛋白原核、真核表达及纯，pQE 载体，原核表达载体，克隆载体 ，毕赤酵母表达载体，毕赤酵母宿主菌，酿酒酵母表达载体 ，酿酒酵母宿主菌，真菌表达载体，真核哺乳动物荧光载体，真核哺乳动物载体，植物表达载体，大肠杆菌宿主菌，枯草宿主菌&酿酒酵母表达载体&pYES2,pYES2/NT,pYES2/CT,pYES3,pYES6, pYCplac22-GFP,酵母载体pAUR123,pRS303TEF,pRS304, pRS305,pRS306,pY13TEF,pY14TEF，pY15TEF，pY16TEF,酵母基因重组表达载体pUG6, pSH47,酵母单杂载体pHISi,pLacZi,pHIS2, pGAD424, 酵母双杂交系统:酿酒酵母Y187,酿酒酵母AH109；质粒pGADT7,pGBKT7；对照质粒pGBKT7-53，pGBKT7-lam，pGADT7-T，PCL1，酿酒酵母菌株INVSc1,YM4271, AH109,Y187,Y190, 毕赤酵母表达载体pPIC9K,pPIC9K-His,pPIC3.5K,pPICZalphaA,B,C,pPICZA,B,C,pGAPZ&A,pAO815,pPIC9k-His,pHIL-S1,pPink hc，配套毕赤酵母Pichiapink,毕赤酵母宿主X33，KM71，KM71H，GS115，&&&原核表达载体pQE30,31,32,40,60,61,62,等原核表达载体,包括pET系列，pET-GST，pGEX系列（含GST标签），pMAL系列pMAL-c2x,-c4x,-c4e,-c5x,-p5x,pBAD,pBADHis,pBADmycHis系列，pQE系列,pTrc99a,pTrcHis系列，pBV220,221,222,pTXB系列，pLLP-ompA,pIN-III-ompA（分泌型表达系列）,pQBI63（原核表达带荧光）pET3a, pET 3d, pET 11a, pET 12a, pET 14b, pET 15b, pET 16b, pET 17b, pET 19b, pET 20b, pET 21a,b,d, pET 22b, pET 23a, pET 23b, pET 24a,b, pET 25b, pET 26b, pET 27b, pET 28a,b, pET 29a, pET 30a, pET 31b, pET 32a, pET 35b, pET 38b, pET 39b, pET 40b, pET 41a,b pET 42a, pET 43.1a,b pET 44a, pET 49b pET302,303 pET His,pET Dsb,pET GST,pET Trx pQE2, pQE9 pQE30,31,32, pQE 40 pQE70 pQE80L pQETirs system pRSET-A pRSET-B pRSET-C pGEX4T-1,-2,-3,5x-1,6p-1,6p-2,2tk,3c pBV220,221,222 pTrcHisA,B,C pBAD24,34,43 pBAD HisA,B,C pPinPoint-Xa1,Xa2,Xa3 pMALc2x, p2x pBV220 pGEM Ex1, pGEM7ZF（+）, pTrc99A, pTwin1, pEZZ18 pkk232-8,pkk 233-3,pACYC184,pBR322,pUC119 pTYB1,pTYB2,pTYB4,pTYB11 pBlueScript SK（+）,pBlueScript SK（-） pLLP ompA, pINIIIompA, pMBP-P ,pMBP-C, 大肠杆菌冷激质粒： pColdI pColdII pColdIII pColdTF 原核共表达质粒：pACYCduet-1,pETduet-1,pCDFduet-1，pRSFduet-1 Takara公司大肠杆菌分子伴侣： pG-KJE8 pGro7 pKJE7 pGTf2 pTf16 大肠杆菌宿主细胞： DH5a JM101 JM103 JM105 JM107 JM109 JM110 Top10 Top10F BL21（DE3） HB101 ER C2566 MG1655 XL-10gold XL blue M15 JF SG1117 BL21（AI） BL21（DE3）plysS TG1 TB1 DH5a（pir） Tuner（DE3） Bl21 codonplusRIPL Novablue（DE3） Rosetta Rosetta（DE3） Rosetta（DE3）plys Rosetta-gami（DE3） Rosetta-gamiB（DE3）, Rosetta-gamiB（DE3）plysS Orgami（DE3） OrgamiB（DE3） HMS174（DE3）&&&植物表达/RNAi载体农杆菌pBI121,pBI121-GFP,pBI101,pBI221,pSN1301, pUN1301,pRTL2 , pRTL2-GFP , pRTL2-CFP, pRTL2-RFP , pRTL2-YFP,pCAMBIA , 04,Z,, 01,pCAMBIA super1300,pCAMBIA super1300-GFP,pPZP212,pPZP2121,pPZP212-GFP,pGDG,RNAi载体pART27,pHANNIBAL,pKANNIBAL, pFGC5941,pTCK303, pTRV1,pTRV2, T-DNA插入载体（随机突变体库）pSKI015,pSKI074,真菌ATMT载体pBIG2RHPH2-GUS-GFP,pBHt1&&&枯草芽孢杆菌表达载体pWB980,pHT43,pHP13,pHP43, pBE2,pMUTIN4,pUB110,pE194,pMA5, pMK3,pMK4,pHT304,pHY300PLK, pBest502,pDG1363,pSG1154,pAX01, pSAS144,pDL,pDG148-stu,pDG641, pAL12,pUCX05-bgaB,pHT01， 配套菌株BS 168,WB600,WB800,WB700, WB800N,1012,FZB42,1A747,广宿主质粒pVLT33&&&RNAi基因沉默干扰敲除载体pSilencer1.0，pSilencer 2.1-U6 hygro， pSilencer 3.1-H1 hygro，pSilencer 3.1-H1 neo， pSilencer 4.1-CMV neo， pSilencer 4.1-CMV puro pMIR-REPORT Luciferase RNAi载体（oligoengine） pSuper-puro RNAi逆转录病毒载体（clontech）: RNAi-Ready pSIREN-Retro Q， RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen（Luciferase shRNA Annealed Oligonucleotide） RNAi慢病毒载体（addgene）: pLKO.1&&&基因cDNA文库ORF表达克隆质粒，&拥有目前中国最大的cDNA克隆库、覆盖10万人、鼠全长基因的cDNA克隆和超过25,000个ORF克隆表达载体。&&&哺乳动物表达载体pcDNA3.1+/-,pcDNA4/HisMax B，pSecTag2 A，pVAX1，pBudCE4.1,pTracer CMV2，pcDNA3.1（-）/myc-His A ，pcDNA6-Myc/His B，pCEP4， pIRES，pIRESneo，pIRES hyg3，pCMV-myc，pCMV-HA，pIRES-puro3，pIRES-neo3,pCAGGS哺乳动物双杂交系统pACT，pBIND，pACT-MyoD，pBIND-Id，pG5luc,pCMV-BD, pCMV-AD, pBD-p53, pFR-luc,Cytotrap Two-Hybrid System:pSos, pSos MAFB, pMyr蜕皮激素诱导系统pIND, pVgRxR,LacSwith II哺乳动物诱导表达系统:pOPRSVI ，pOPI3CAT，pCMVLacI,GeneSwitch System:pSwitch哺乳动物表面展示系统:pDisplay, 四环素调控系统（Invitrogen）：pcDNA4/TO/Myc-His A，pcDNA4/TO/Myc-His B，pcDNA4/TO/Myc-His C，pcDNA4/TO/Myc-His/LacZ，pcDNA6/TR四环素调控系统（Clontech）：pTet-On，pTet-Off，pTRE2,pRevTRE，pRevTet-On，pRevTet-off信号通路报告载体:pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pI&B-EGFP，pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-LpGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFAT-RE/Hygro]，pGL4.75;p53-Luc，pAP-1-Luc， pNF-&B-Luc，pSRE-Luc，pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc,Gateway系统（invitrogen）pcDNA6.2-GWEmGFP-miR negative, pLenti 6/TR,pcDNA 6.2-GW EmGFP-miR，&&&乳酸菌表达载体及各种乳酸菌乳酸杆菌菌株，pNZ8148,pLEISS,pMG36e,pBBR1MCS-5,pBBR1MCS-6,pRV610,pLEM415,pHY300PLK,分泌型乳酸菌表达载体pVE5523，pPG611.1,pPG612.1等和乳酸杆菌菌株宿主菌NZ9000,MG1363,Lactobacillus casei 1.539,Lactobacillus casei,acidophilus NCFM,1.2,Lactobacillus sakei 23K,L.plantarum,L.rhamnosus GG,B.coagulans,Bifidobacterium bifidum,Bifidobacterium infantis,Lactococcus lactis M17,1663,Lactobacillus reuterii&&&广宿主表达载体链球菌表达敲除载体假单胞菌表达载体pVLT33,pBBR1MCS-2,3,4,5,6, pJRD215,pJN105,pME6032,Cos载体pLAFR3,pMP2444（GFP）, pHY300PLK,pRT102,pRL1063a, 转座子载体pUT-miniTn5,pMGS100, pWHM10,pKC1139,pSET152, pOJ260,pPG611.1,pPG612.1，&&&腺病毒载体/慢病毒，逆转录病毒表达载体及包装包膜质粒，腺病毒系统（Stratagene）: pAdEasy-1,pShuttle-CMV,pShuttle,pAdTrack, pAdTrack-CMV, pShuttle-IRES-hrGFP-1、pShuttle-IRES-hrGFP-2、pShuttle-CMV-lacZ, pShuttle-CMV-EGFP-C,pXC1, pBHGE3, 配套大肠杆菌BJT cell line 腺相关病毒系统（Stratagene）： pAAV-MCS，pAAV-RC，pHelper，pAAV-LacZ，pAAV-IRES-hrGFP，pCMV-MCS， 慢病毒载体:pLVX-DsRed-Monomer-N1,pLVX-IRES-ZsGreen1,pLVX-AcGFP1-N1,Lenti6/v5-EDST-EGFP,pWPXL, FUGW,pLentilox 3.7,RNAi-Ready pSIREN-Retro Q, RNAi-Ready pSIREN-Retro Q-ZsGreen, pSUPER.Retro-GFP/Neo,pSUPER-Retro-Neo, pSUPER.Retro-puro,PLNCX PLNCX2 pMSCV-HYG pMSCV-neo pMSCV-puro pLEGFP-C1 pLOX-CW-CRE pLOX-GFP-IRES-TK pRetroX-IRES-DsRedExpress, pLVX-IRES-mCherry质粒载体。 病毒包装：二质粒包装系统一： psPAX2 pMD2.G 二质粒系统二： pCMV-dR8.2 dvpr pCMV-VSVG 三质粒包装系统具有更高的包装效率： pMDLg/pRRE pRSV-Rev pMD2.G Invitrogen包装系统： PLP1 PLP2 PLP/VSVG&&&基因重组载体敲除载体自杀质粒RED重组系统载体pKD3,pKD13,pKD4,pCP20,pKD46, pCVD442,pk18mobsacB,p2NIL, pMAD（革兰氏阳性菌基因敲除），pBT2,RN4220,pKC1139,pOJ260, pJQ200SK,pSET152,pWHM10, pk18mobsacB, pGOAL17,pGOAL19,基因打靶载体PL253，PL451，PL452，PL453,配套菌株EL250,EL350,pMLM290,292, KJBAC1,pST1374&&&荧光蛋白表达载体荧光定位质粒报告基因载体pEGFP,pEYFP,pECFP,pDsRED, pmCherry,pAcGFP,hrGFP,ZsGreen，pDsRed1-C1, pDsRed1-N1, pDsRED-Monomer-N1, pEYFP-C1, pEYFP-N1, pEGFP-1，pEGFP-C1, pEGFP-N1, pEGFP-N3, pcDNA-EGFP1,pECFP-N1,pECFP-C1, pAcGFP1-1 pDsRED2-ER, pDsRED2-Mito, pDsRED2-Nuc，pDsRED2-Peroxi , pEYFP-Golgi, pEYFP-Mem, pEYFP-ER , pEGFP-Actin, pECFP-ER, pIRES2-EGFP, pLEGFP-C1，pLEGFP-N1，pDsRED-Express-N1,pIRES2-DsRed,pIRES-AcGFP1,pmCherry-C1,N1 启动子增强子报告载体（Promega，带有Luc荧光报告基因）： pGL3-basic，pGL3-control，pGL3-enhancer，pGL3-promoter，pRL-TK，pRL-CMV，pRL-SV40, 信号通路报告载体（Clontech）： pGAS-TA-Luc，pSTAT3-TA-Luc, pISRE-TA-Luc, pTA-Luc，pI&B-EGFP， pNFAT-TA-Luc，pCaspase3-sensor，pAP1（PMA）-Luc 信号通路报告载体（Promega）：pGL4.26[luc2P/minP/Hygro],pGL4.29[luc2P/CRE/Hygro],pGL4.30[luc2P/NFAT-RE/Hygro]，pGL4.75 信号通路报告载体（Stratagene）： p53-Luc，pAP-1-Luc，pNF-&B-Luc，pSRE-Luc， pFA2-Elk1，pFC-MEKK，pFR-luc&&&昆虫表达载体杆状病毒表达载体系统pFastBac1,pFastBac1-Gus,pFastBacHT A pFastBacHT-CAT,pFastBacDual,pBlueBacHis2 A DH10Bac配套大肠杆菌,pMIB v5-His B ,pIZT/V5-His，&&&Taq,Pfu高表达载体菌株KOD, T4连接酶高表达质粒载体,高产基因工程菌株、酶基因KOD,T4 kinase激酶，Tth反转录酶MMLV，Klentaq PCR酶，Cre酶，RNA inhibitor抑制酶，DL2000质粒&&&BiFC双分子荧光表达载体FRET系统载体pBiFC-VC155，pBiFC-VN173，pBiFC-bFosVC155，pBiFC-bFos（deltaZIP）VC155，pBiFC-bjun-VN173，pCE-BiFC-VN173，pCE-BiFC-VC155，&&&真菌表达载体黑曲霉米曲霉黄曲霉表达质粒pBC-hygro,pAN7-1,pBARGPE1, 真菌ATMT农杆菌介导转化载体 pBHt1,pBIG2RHPH2-GFP-GUS等，&&&酵母单杂交三杂交载体，酵母双杂交系统pGBKT7，pGADT7，pCL1，pGBKT7-53，pGADT7-T，pGBKT7-Lam，配套酿酒酵母AH109 酵母单杂交系统（Clontech）:pHISi,pLacZi,pHis2,pHIS2.1 酵母三杂交系统:pBridge, YBZ1菌株 Cytotrap Two-Hybrid System（Stratagene）: pSos, pSos MAFB, pMyr&&&噬菌体展示系统载体1.噬菌体展示抗体scFv 质粒：pCANTAB5E 宿主菌：TG1 辅助噬菌体：M13K07 可溶表达菌：HB2151 2.噬菌体展示抗体Fab 质粒：pcomb3 宿主菌：XL1-Blue 辅助噬菌体：VCSM13&pEVOL，pBudCE4.1,pBudCE4.1-EGFP,Zeocin,pEGFP-C3,2,1,pmCherry-C1,-N1,pLOVE-miR302/367,pDsRed2-N1,pAcGFP1.1,TALE toolbox kit,pIRES-hyg3,pIRES-Neo3,pIRES-puro3,pSIREN-RetroQ-ZsGreen,GST 14-3-3,pDsRed-Monomer-N1,M50 super8x TOPFlash,pRK793,pCMV-tag5B,pCMV-tag2B，pCMV-N-HA，pUAST,pw-25,PAC-5.1-HISA，pSLIK-Neo,pCMV-myc-cyto,pCMV-myc-nuc,疫苗表达载体pVAX1,pAdEasy-1,pShuttle,pAdTrack,pAdTrack-CMV,-polyA,pShuttle-EGFP,BJ5183,pXC1,pBHGE3,pSUPER-retro-GFP-Neo,pORF-lacZ，pORF-TK，pCOX2-Luc,pcDNA3.1（-）-myc-His A,pcDNA3.1-p300,pINP, pOprE, pCR2.1 TOPO,pLP1,pLP2,pLP/VSVG,Stbl3,plenti6/V5-DEST,pLVX-shRNA1,2,pLVX-IRES,tdTomato,FUW-teto-hOCT4,hSOX2,hMYC,hKLF4,FUW-M2rtTA,pSecTag2 A,pEYFP-C1,pEGFP-N1,-C1,pcDNA3.1-V5-His A,B,C,pcDNA3.1-EGFP,pLEGFP-C1,&-MHC Promoter,Marc-145猴肾细胞，Sf9，BmN昆虫家蚕细胞，酵母载体pYES2,pYES2.0,INVSc1,pYES3,pYES6,pRS41H,pRS303,304,305，306,pRS424,425,426,414,415,416,pY13,14,15,16,YBZ1,L40酵母菌，pESC-His,pYIP5,pHIS2,pHIS2.1,pHISi,pLacZi,酵母重组载体pUG6,pSH47,植物载体pCAMBIA1300-EGFP, pTCK303,pTRV1,pTRV2,pFGC5941,pUN1301,pSN，R1601,AGL1农杆菌感受态，原核载体pQE3,pQE30,31,32,pQE60,61,62,M15,DH10Bac,Origami（B）DE3,XL1-Blue,Rosetta gamiB（DE3）pLysS,TKB1,ER2566，DB3.1，JM105,TOP10,DH5a,DH5alpha lambda pir,C43（DE3）菌株感受态，pTrcHis A,B,C,pTWIN1,pTYB1,pTYB11,pACYC184,pMAL-c5x,c2x,p5x,c4x,pBV220,221,222,pCold I,II,III,TF,pET22a,pET29a,pET28a,pET39b,pET41a,pET42a,p15A,pET-sumo,pBADHis A,B,C,pBAD24,34,pETDuet-1,pRSFDuet-1,pCDFDuet-1,pACYCDuet-1,原核荧光pQBI63,pMP2444,链球菌表达、敲除载体pKC1139、pOJ260、pWHM3，pSET152，pVA981，多宿主载体pGOAL19,pBBR1MCS-2,-5,-6,pDSK519,pLA2917，pRK2013，pVLT33,pMAD,RN4220金葡菌株，真菌载体pBARGPE1,pAN7-1,pBHt1,pBIG2RHPH2-GFP-GUS,乳酸菌载体MG1363,pNZ8148,NZ9000,pNZ9530,pMG36e,枯草芽孢杆菌载体pHT43,pWB980,pHT300PLK,pMA5,pUTminiTn5,巨大芽孢杆菌表达载体pHIS1525,WH320菌,谷氨酸棒状杆菌表达载体pEC-XK99E,敲除载体pk18mobsacB,pET载体3a, 3d3c-sumo5b11a A+&12a A+15b A+16b A+17b A+19b A+20b A+21a,21b,21d A+22b A+23a,23b A+23a-tev24a K+25b K+26b K+27b K+28a,28b,28c K+28a-sumo28a-p5329a K+30a ,30c K+31b A+32a A+32a pelB A+35b K+39b K+40b K+41a,41b k+42a,42b K+43b A+43.1a A+44a A+48b K+49b K+50b K+pETduet-1pACYCduet-1pCDFduet-1pRSFduet-1pColAduet-1pET HispET DsbApET GSTpET TrxpQE载体PQE2pQE9pQE30,31,32,pQE30UApQE30LacIqpQE40LpQE60pQE70pQE80L&其他原核表达载体PBBR1 MCS Cm+PBBR1 MCS-2 K+PBBR1 MCS-3 Tet+PBBR1 MCS-4 A+PBBR1 MCS-5 庆大霉素&&pMal c2x,p2x,5x,5EpBV220,221,222pTrc99a,pTrcCKS，pTrcHis A,B,CpBAD24,33,43,pBADHis A,B,C,pBADmycHisApEZZ18pThio HisA A+pGEX4T-1,4T-2，4T-3，5X-1,6p-1,2t,3xpColdIpColdIIpColdIIIpColdTFpTwin1pRsetA,B,CPLLP-STQpINⅢ-ompApkk223-3pSE380pJLA502pMBP-C，pMBP-ppTYB11,pCYB1Origene-N-His GST A+pPin point CAT A+pPin point xa1 A+pPin point xa2 A+pPin point xa3 A+pCW ori&、&常见克隆载体puc18,puc19，puc118，puc119pBlue Script SK+,pBlue ScriptⅡSK+pEGM-3ZF（+） A+pEGM-11ZF（+） A+pACYC184pBR322&基因敲除pKD3,pKD4，pKD46,pcp20pK18mobSacB&海肾荧光素酶报告基因pGL3basic，promotor，enhancer，controlpGL3 CMpGL4.29,4.30&&毕赤酵母表达载体pPIC9pPIC9kpPIC9k-1pPIC9k-HispPIC3.5pPIC3.5kpAO815pHIL-S1pPICZalphaA，B，CpPICZalpha DpPICZalpha EpPICZalpha GA,GBpPICZalpha FCpPICZA，BpGAPZalphaA，B，CpMETalphaA,B,CpFLD-cat A+pFLD-cat Z+pFLD1 Z+&毕赤酵母宿主菌JC220JC308GS200GS190GS115KM71KM71HY1991SMD1168SMD1168HX33&&&酿酒酵母表达载体pYES2,pYES2-flagpYES2NTA,NTB,NTCpYES3CTpYIP5,pYRP7,pADH2pRSH41,pDC315,pDF15,pUG6pESC-His,BFD14,BFD15,pDNR1,p334,pDR195pRS316,pRS316HAYEplac112,YCplac33,YCplac22-EGFP,YEplac195，YEpLac181,YIP211pYX212，pYX212-VHB&酿酒酵母宿主菌INSV-YPH499YM4271BY4741W303-1A&真核哺乳动物荧光载体pEGFP N1,N2，N3Origene GFPpLEGFP N1pEGFP C1，C3AIF-EGFP N1pECFP N1,C1pEYFP N1,C1pEYFP-golgipEYFPmempBFPN1FIV-BFPpDsred MonomerN1pDsRed1 mitopDsRed2 mitopDsRed N1，C1pDsRed2 N1,C1pDsRed2-ERmRFP&真核哺乳动物载体pIRESpIRES2-EGFPpADeasy-1pADeasy-1（Bj5183）pAdtrackpAdtrack CMVpShuttlepShuttle CMVpRL CMVpCMV-HApVAX1pVASTpCIpCI neo+pCMV-mycpflag-CMV2pcDNA3.1 +pcDNA3.1 zeo+pcDNA3.1 neo+pcDNA3.1 MycHisApcDNA3.1 MycHisBpcDNA3.1-HBV genomepcDNA3-mRFPHsp70-pcDNA3.1pcDNA 4 Max Bpsuper GFP neopsuper Retro GFP neopSilencer4.1CMV puro+pSilencer4.1CM neo+psuper GFP neopsuper retro GFP neopdisplaypBud CE4.1ptet on, ptet offpRL-tk，pRL-CMV&&&植物表达载体pcambia03,&&&&&& &&&&&& 3300pcambia1301（EHA105）pcambiaZPBI121，221PBI221-GFP&植物农杆菌宿主EHA105，LBA4404&植物RNAi载体PHANNIBAL，PKANNIBAL&启动子检测pEGFP-1pkk232-8&分子伴侣：PGKJE8，PGro7，pTf16，pKJE7，pGTf2&酵母双杂交pGADT7,pGBKT7,pGADT7-T,pGBKlam,pGBK-53,pCL1AH109,Y187&酵母单杂交pGAD53m,p53-blue,p53-His,pLacZ,pHis，pHisi-1，&&哺乳动物双杂交pBIND-GFP，pBIND-ID,pGAD424，pGBT9，pG5lac,&&大肠杆菌宿主菌JM101,105,109,110HB101,K802,C600,TH1,AM1,W3110,DH10bacY,BL21,BL21（DE3）,MG1655BL21（DE3）plysS，BL21AI，BL21SI，BL21codon plus RIPL，BL21 trxB （DE3），BL21 starDH5&，DH5&&pir，JM109，JM109（DE3），Top10，Top10F，,K12，DB3.1，XL1-blue，XL-10gold，BM25.8，SG1117，Turbo，TG1，TB1，C41（DE3），C43（DE3）,Turner（DE3）,M15，E2566，C2566，ER2529，JF1125，Bj5183,Stbl3,Stbl4HMS174（DE3）, HMS174（DE3）plysS, AD494（DE3）Novablue（DE3）,Rosettalblue（DE3）Rosetta（DE3）,Rosetta（DE5）,Rosetta（DE3）plysS,Orgami（DE3）,OrgamiB（DE3）,Orgami（DE3）plysSRosetta-gami2（DE3）plysS，Rosetta-gami（DE3）,Rosetta-gamiB（DE3）,Rosetta-gamiB（DE3）plysS, Rosetta-gami（DE3）placI&&&&枯草表达系统pMA5,pHCMC05，pGFP22,pGFP315，pHP13,pHP13-43，pHY-43，pWB980,pAOX1枯草宿主菌：BS168，DB403,BCL,1A75,WB600，WB800N&昆虫表达系统：pfastBacI，pfastII，pfastIII，pfastBacHTA，pfastBacHTB，pfastBacHTC，pfastBacdual&巨大芽孢杆菌系统：pHis1525巨大宿主菌：YYBM1，WH320&乳酸球菌表达系统&pMG36e,NZ9000,MG1363&乳酸酵母表达系统&pKLAC1，GG799&白色念珠菌系统pCR4,pCR4-GFP,p5921&酿酒酵母表面展示系统：pYD1,EBY100&标准微生物菌株ATCC27853 铜绿假单胞菌ATCC29212 粪链球菌ATCC29213 金黄色葡萄球菌ATCC35218 大肠杆菌ATCC 35098四联球菌NRRL Y-12968热带假丝酵母NRRL Y-2021德巴利酵母NRRL Y-1603毕赤氏巴斯德酵母DSM3586野油菜黄&
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酵母双杂交H2Y和Y187系统protocol.doc 55页
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酵母双杂交H2Y和Y187系统protocol
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目录介绍 4试剂盒物品清单 7额外附加物品列表 9酵母菌株 11酵母载体 14方法简述：单杂交文库的构建和筛选 16方法简述：双杂交文库的构建和筛选 17构建用于酵母单杂交的报告质粒载体 18构建用于酵母双杂交的DNA-BD融合载体 19构建生成cDNA文库 21构建和筛选酵母单杂交和双杂交文库（简述） 27酵母单杂交文库的构建和筛选 28酵母双杂交文库的构建和筛选 30方法A:通过酵母配对（YeastMating）来筛选目的蛋白 30方法B:通过共转化的方法筛选目的蛋白 35分析阳性相互作用结果 38问题解决指南 44参考文献 47相关产品 50附录A:双链cDNA合成的典型结果 51附录B:酵母感受态的制备—LiAc法 52附录C：单杂交对照载体信息 53附录D：双杂对照载体信息 54表格列表TableI．BDMatchmaker酵母菌株的基因型 11TableII．BDMatchmaker酵母菌株的表型 11TableIII．单杂交系统的载体 14TableIV．双杂交系统的载体 15TableV．各BD-MatchmakerDNA-BD载体的比较 19TableVI．RNA起始浓度和PCR扩增循环数之间的关系 24TableVII．单杂交共转化的对照实验的设置 29TableVIII．单杂共转化对照实验：期望的结果 29TableIX．双杂交转化的对照实验的设置 33TableX．双杂交配对筛选的对照实验的设置TableXI．双杂交共转化的对照实验的设置TableXII．双杂交共转化的对照实验：期望的结果TableXIII．用于PCR筛选菌落的AssemblingMasterMixs图片列表Figure1．使用BDMatchmaker单杂交系统筛选蛋白-DNA相互作用 4Figure2．使用BDMatchmaker单杂交系统筛选蛋白-蛋白相互作用 4Figure3．酵母单杂交和双杂交筛选的大致步骤 5Figure4．构建和筛选BDMatchmaker酵母单杂交和双杂交文库 6Figure5．酵母菌株AH109和Y187中的报告基因 12Figure6．BDMatchmaker酵母单杂交文库的构建和筛选 16Figure7．BDMatchmaker酵母双杂交文库的构建和筛选 17Figure8．用BDSMART技术合成高质量的dscDNA 21Figure9．BDCHROMASPIN纯化柱和收集管 26Figure10．通过酵母重整合作用来构建AD融合文库 27Figure11．为双杂交筛选AD融合文库 32Figure12．分析和证明可能的单杂交和双杂交相互作用阳性结果的策略 39Figure13．通过酵母配对来验证蛋白-蛋白相互作用 42Figure14．用对照用人胎盘PolyA+RNA合成双链cDNA 51Figure15．p53HIS对照载体的图谱 53Figure16．pGAD-Rec2-53AD对照载体的图谱 53Figure17．pGADT7-RecTAD对照载体的图谱 54Figure18．pGBKT7-53DNA-BD对照载体图谱 54Figure19．pGBKT7-LamDNA-BD对照载体图谱 55（一）介绍BDMatchmakerTMLibraryConstruction&Screening试剂盒提供一种简便的方法构建cDNA文库用来进行酵母双杂交和单杂交的筛选，这些试剂盒结合了BDMatchmakerTMSystems和BDSMARTTMcDNASynthesis的技术，只需要用任何组织的1μgpolyA+RNA或totalRNA就能构建cDNA文库。通过一般细胞内克隆步骤，你能利用BDMatchmakerSystems所提供的灵敏的转录方法所构建的文库来进行单杂交或双杂交实验。单杂交实验的原理——蛋白-DNA相互作用实验单杂交实验使你能够确定和描述蛋白与目的顺式DNA激活序列的绑定，该序列可能是处于最小限度的启动子上游的用于增强转录的元件。这个实验也可以用于预测或新蛋白的DNA绑定结构域的确定。通过BDMatchmakerOne-HybridSystem你可以很容易的获得这些基因表达的蛋白在BDMatchmakerOne-Hybrid实验中，潜在的DNA绑定蛋白基因是与克隆在pGADT7-Rec2（为单杂交设计的低拷贝载体）上GAL4激活结构域（AD）序列一起融合表达的。一个或多个目的DNA序列的串联拷贝被构建在pHIS2（含有HIS3营养缺陷报告基因的报告载体）。DNA绑定蛋白和目标序列的相互作用会激活HIS3的转录（Figure1），该过程要在宿主菌株Y187（组氨酸缺陷型）中进行并在缺少组氨酸的培养基生长双杂交实验的原理——蛋白-蛋白相互作用的原理双杂实验分析能用于鉴定新
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